Գուցե դուք ուզում եք սպիտակուցը դենատուրացնել գիտական ծրագրի համար, կամ գուցե դուք կարդացել եք դենատուրացված սննդի մասին և ցանկանում եք իմանալ, թե ինչպես է դա աշխատում: Դենատուրացիան այն գործընթացն է, որով սպիտակուցը կորցնում է իր ձևն ու կառուցվածքը արտաքին ուժերի, այդ թվում `ջերմության, ճառագայթման, թթուների և լուծիչների ազդեցության պատճառով: Օրգանական լուծիչները սովորաբար սպիտակեցնում են սպիտակուցներ: Սպիտակուցը դենատուրացիայի ենթարկելու ճշգրիտ եղանակը կախված է այն կոնկրետից, որի հետ ցանկանում եք աշխատել, քանի որ դրանք բոլորը պահանջում են տարբեր մակարդակների տարբեր դենատուրացնող միջոցներ: Proteinանկացած սպիտակուցի մեծ մասը կարող է վերափոխվել, չնայած, եթե գիտեք, թե ինչ փոխել սպիտակուցի միջավայրում:
Քայլեր
Մեթոդ 1 2 -ից. Սպիտակուցի Denaturing
Քայլ 1. Օգտագործեք ջերմություն:
Heերմությունը սպիտակուցը դեֆորմացնելու ամենահեշտ ձեւերից մեկն է եւ ամենատարածվածը: Երբ տվյալ սպիտակուցը առկա է սննդի մեջ, պարզապես ուտելիքը եփելը սպիտակուցները կվերափոխի: Շատ սպիտակուցներ կարող են դենատուրացվել ՝ դրանք ենթարկելով 100 ° C (212 ° F) կամ ավելի բարձր ջերմաստիճանի: Սա թույլ է տալիս սպիտակուցները մակարդվել և նվազեցնել դրանց լուծելիությունը:
Ազդեցության տևողությունը կախված է նրանից, թե ինչ եք ենթարկվում ջերմության: Օրինակ, ձուն կարող է տապակի մեջ եփվել միջին ջերմության վրա հինգ րոպեում, մինչդեռ տապակածը կարող է ժամեր տևել ջեռոցում:
Քայլ 2. Կիրառեք ալկոհոլ:
Ալկոհոլը խաթարում է ջրածնային կապերը, որոնք առաջանում են պեպտիդային կապի ամիդային խմբերի միջև: Երբ սպիտակուցը ենթարկվում է ալկոհոլի լուծույթի, ալկոհոլի մոլեկուլները նոր կապեր են ստեղծում սպիտակուցային շղթայի հետ: Օգտագործեք 70% ալկոհոլի լուծույթ `մանրէների բջջային պատը ճեղքելու և սպիտակուցը դենատուրացնելու համար:
Խտացրած սպիրտները կարող են վտանգավոր լինել, քանի որ դրանք և՛ դյուրավառ են, և՛ թունավոր: Միշտ հագեք անվտանգության լիարժեք սարքավորումներ, ներառյալ ձեռնոցներ և աչքերի պաշտպանություն, և բռնեք ապահով, ջերմաստիճանի վերահսկվող միջավայրում:
Քայլ 3. Փոխեք pH- ը:
Սպիտակուցի ներքին կառուցվածքը կարող է քայքայվել, երբ նրա միջավայրը շատ թթու է կամ շատ ալկալային, քանի որ դրանք խաթարում են սպիտակուցի աղի կամուրջները միացնող իոնային կապերը: Սպիտակուցին ավելացրեք թթու կամ բազային լուծույթ: Շրջապատող միջավայրը պետք է լինի 10 -ից բարձր կամ 4 -ից ցածր pH- ում `դենատուրացիան խրախուսելու համար: Եթե փոփոխությունը առաջացնում եք թթվով, ապա pH- ը պետք է լինի 2 -ից 5 -ի սահմաններում:
PH- ի փոփոխությունը կարող է իոնացնել ամինաթթուն ՝ կախված այդ ամինաթթվի յուրաքանչյուր ֆունկցիոնալ խմբի pKa- ից: Կարող եք նաև իոնացնել ամինաթթուում առկա ամինախումբը կամ կարբոքսիլ խումբը:
Քայլ 4. Փորձեք ծանր մետաղի աղեր:
Metանր մետաղները կարող են խաթարել սպիտակուցի կապերը, ինչի արդյունքում այն կկորցնի իր կառուցվածքը: Heavyանր մետաղների աղեր, ինչպիսիք են սնդիկը և կապարը, կարող են օգտագործվել տարբեր սպիտակուցներ դենատուրացնելու համար: Նման աղերը հասանելի են քիմիական մատակարարներից շատերի համար և միշտ պետք է օգտագործվեն զգուշությամբ և համապատասխան անվտանգության սարքավորումներով, ներառյալ ձեռնոցներն ու աչքերի պաշտպանությունը:
Heանր մետաղները կարող են փոխազդել սպիտակուցի ֆունկցիոնալ կողային շղթայի խմբերի հետ `կազմելով բարդույթներ: Alsանր մետաղները նաեւ օքսիդացնում են սպիտակուցի ամինաթթուների կողային շղթաները:
Մեթոդ 2 -ից 2 -ը. Սպիտակուցների վերականգնում
Քայլ 1. Որոշեք, արդյոք սպիտակուցը կարող է փաթաթվել:
Դենատուրացիայի որոշ ձևեր մշտական են, իսկ մյուսները կարող են հետարկվել: Ձու կամ միս պատրաստելը, օրինակ, չի կարող հետարկվել, բայց սպիտակուցը, որը ենթարկվել է բարձր pH- ի, կարող է վերականգնել իր ձևը, երբ դրվում է ավելի չեզոք միջավայրում:
Սպիտակուցը կարող է նորից փաթաթվել, թե ոչ, կախված կլինի նրա ԴՆԹ -ից: ԴՆԹ -ն կպահպանի սպիտակուցի հարազատ վիճակին վերադառնալու համար անհրաժեշտ տեղեկատվությունը:
Քայլ 2. Հեռացրեք վերափոխման գործոնը:
Սպիտակուցի շրջակա միջավայրը վերադարձեք լճացման և հեռացրեք դենատուրացնող տարրը: Հեռացրեք թթուն կամ հիմքը, օրինակ, կամ բերեք սպիտակուցը ավելի ողջամիտ ջերմաստիճանի:
Քայլ 3. Օգտագործեք վերագնահատման հավաքածու:
Լաբորատոր պարագաների մատակարարմամբ զբաղվող ընկերություններ վաճառում են վերագնահատման հավաքածուներ, որոնք թույլ են տալիս զննել լավագույն պարամետրերը `խթանելու համար վերագնահատումը: Նման հավաքածուները կարող են հատկապես օգտակար լինել, եթե դուք սպիտակուցներին նայում եք լաբորատոր կամ փորձնական պայմաններում:
Խորհուրդներ
- Դենատուրացված սպիտակուցը կորցնում է իր չորրորդական, երրորդական և երկրորդային կառուցվածքը, որն ակնհայտ է իր հայրենի վիճակում, սակայն դրա առաջնային կառուցվածքը կմնա:
- Դենատուրացված սպիտակուցը նույնպես կորցնում է որոշ կենսաակտիվություն, որոշ դեպքերում, ինչպես ֆերմենտների դեպքում, կորցնելով իր գործառական կարողությունը: Օրինակ, հիմքերը կարող են այլևս չկարողանալ կապվել դենատուրացված ֆերմենտների հետ:
- Դենատուրացված սպիտակուցը կարող է կորցնել իր լուծելիությունը լուծույթի մեջ:
- Դուք կարող եք նաև դենատուրացնել նուկլեինաթթուները ՝ օգտագործելով շերտերն առանձնացնելու լաբորատոր տեխնիկա:
